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PVDF膜和NC膜
时间:2023-7-17 7:54:14   来源:   作者:梅少周
 

PVDF

常见用于免疫印迹(immunoblot, Western blot)时蛋白从胶到膜的转印,也可用于吸附分析、氨基酸分析、N端蛋白质测序、点和狭缝印迹检测(dot and slot blot)、糖蛋白显色和脂多糖分析等。

PVDF膜的孔径为0.45μm,适用于大多数的免疫印迹,特别适用于分子量大于20kDa的蛋白质。PVDF膜的孔径为0.2μm,适用于大多数的免疫印迹,特别适用于分子量小于20kDa的蛋白质,可以有效减少小分子量蛋白的渗漏。比0.45μm PVDF膜具有更高的蛋白质吸附率和蛋白测序得率,例如对于胰岛素、BSA的吸附能力分别是常用的0.45μm PVDF膜的约1.64倍和1.58倍。

与硝酸纤维素膜(Nitrocellulose membrane, NC)相比,PVDF膜具有多种优点。PVDF膜具有很高的机械强度,不易破裂或卷曲;具有背景低、溶剂相容性广,以及着色能力优异等优点;此外,PVDF膜经适当处理后还可以重复检测。

 

NC

硝酸纤维素膜是一种孔径为0.22um/0.45um的硝酸纤维素印迹膜(nitrocellulose membrane,简称NC),适用于western blot时蛋白从胶到膜的转印,以及核酸检测时核酸的转印。硝酸纤维素膜具有良好的结合载量,且背景很低,但机械强度低于PVDF膜。硝酸纤维素膜是世界上实用最为广泛的特异性转移介质之一,硝酸纤维素膜采用100%纯硝酸纤维素材料制成,确保了最高的结合能力。

具有使用方便,操作简单,兼容多种检测方法的优点,与PVDF膜相比,不需要甲醇浸泡过程,这样使得那些需要亲水环境下的蛋白质转移。在转移前,仅需要在水中简单润湿,然后置于转移缓冲液中,不需要其他的预湿步骤了。除了具有高结合力外,硝酸纤维素膜本身产生的背景非常低,膜特有的表面性质保证了优异的信噪比,在膜洗脱时不需要严格的洗脱条件。硝酸纤维膜有多种孔径以供选择,按照不同的使用要求进行选择相应的孔径的膜,0.22um的硝酸纤维素膜通过小孔径来截留分子量小于20kD的蛋白质分子。0.45um的膜是较大分子蛋白和核酸的理想选择,0.1um 的膜常用于分子量小于7kD的蛋白质。

 


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