| 英文名称 | EDTA Antigen Retrieval Solution,50× |
|---|
| 储存条件 | RT,有效期1年 |
|---|
| 单位 | 瓶 |
|---|
细胞或组织用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后,会导致细胞内抗原形成醛键、羧甲键而被封闭了部分抗原决定簇,同时蛋白之间发生交联而使抗原决定簇隐蔽,导致免疫染色时染色信号减弱,甚至出现一些假阴性染色结果。所以要求在进行免疫组化染色时,需要先进行抗原修复或暴露,即将固定时分子之间所形成的交联破坏,而恢复抗原的原有空间形态。从而提高抗原的检出率,降低背景染色,提高检测的准确性。 EDTA抗原修复液(EDTA Antigen Retrieval solution,50×)是一种常用的抗原修复液,可以用于石蜡切片、冰冻切片等样品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。可以有效去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联,充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。 通常石蜡切片都需进行抗原修复处理,而冰冻切片可以不进行抗原修复处理。抗原修复可以提高石蜡切片的免疫染色效果,亦可以不同程度的提高冰冻切片的染色效果。当冰冻切片免疫染色效果不理想时,考虑进行抗原修复。 按照每个片子需要10ml抗原修复液(1×)计算,100ml抗原修复液(50×)可以用于500个样本的抗原修复。
使用说明(仅供参考) 石蜡切片 1.脱蜡:切片在二甲苯中脱蜡5分钟,再换用新鲜的二甲苯脱蜡,共用二甲苯脱蜡3次。无水乙醇5分钟,两次。90%乙醇5分钟,两次,70%乙醇5分钟,一次。蒸馏水5分钟,两次。 2.抗原修复:用重蒸水或Milli-Q水将本抗原修复液(50X)稀释50倍,配制成抗原修复液(1X),例如1ml本抗原修复液(50X)加入49ml重蒸水或Milli-Q水,混合均匀,即得50ml抗原修复液(1X)。将切片浸泡在抗原修复液(1X)中,95-100ºC加热约15分钟(加热时间可以控制在10-20分钟内,最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。抗原修复液(1X)使用前需预热到95-100ºC。加热可以使用普通的水浴锅,也可以使用微波炉加热。如果使用微波炉加热,需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在20-30分钟内冷却至室温。 3.用洗涤液洗涤1-2次,每次3-5分钟。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。 冰冻切片 1.用洗涤液洗涤切片5分钟。 2.将切片浸泡在抗原修复液(1X)中,95-100ºC加热约15分钟(加热时间可以控制在10-20分钟内,最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。抗原修复液(1X)使用前需预热到95-100ºC。加热可以使用普通的水浴锅,也可以使用微波炉加热。如果使用微波炉加热,需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。 3.随后大约在20-30分钟内冷却至室温。用洗涤液洗涤1-2次,每次3-5分钟。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。 注意: 1. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。 2. 为了您的安全和健康,请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
|